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12-HETE Elisa Kit 
12-HETE Elisa Kit
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英文名稱 : Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid, 12-HETE Elisa Kit
貨號 : EY-00H1156
規格 : 96T/48T
品牌 : 上海一研
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12-HETE Elisa Kit原理:

ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。

12-HETE Elisa Kit 組成:

序號

名稱

規格

1

酶標包被板

96 孔*1 可拆卸板

2

酶結合物

10ml*1

3

標準品

1ml*6

4

緩沖液

6ml*1

5

顯色劑 A 液

6ml*1

6

顯色劑 B 液

6ml*1

7

終止液

6ml*1

8

濃縮洗滌液(*100)

50ml*1

9

封板膜

1

10

使用說明書

1

自備材料

1)蒸餾水。

2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3)振蕩器及磁力攪拌器等。

12-HETE Elisa Kit 標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.操作步驟

1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照2 孔、空白對照 1

孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

12-HETE Elisa Kit 數據計算

1. 繪制標準曲線:各標準品 OD 值減去底色即減去空白孔 OD 值,以 6 個標準

品的 OD 值為縱坐標 y,以標準品的濃度為橫坐標 x,繪制曲線圖,如圖示,

并計算出回歸方程 y=ax+b。

2. 將待測樣品的 OD 值代入方程式,計算各組樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即

為樣品的實際 ABP 濃度。

3. 敏感度:1.0 pg/ml

圖片1.png

注意事項:

1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。

2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響

實驗的準確性以及重復性。

3. 孵育:嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。

4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請提前加入終止液終止反應。

5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。

6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商聯系,

如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。

12-HETE Elisa Kit安全性

1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8℃

2.有效期:6個月


買家數量成交時間
正品保障

確保所有產品都是原裝正品

優質服務

優質服務,售后無憂

安全包裝

統一包裝,保障產品安全運輸

正規發票

機打發票,附箱送達

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